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自1565年起，先后到武当山、庐山、茅山、牛首山等地收集药物标本和处方，并拜渔人、樵夫、农民、车夫、药工、捕蛇者为师，记录上千万字札记，历经二十七个寒暑，三易其稿，于明万历十八年（1590年）完成了192万字的巨著《本草纲目》。1593年，李时珍逝世。